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存储:2-8℃,避光
EB染色液是EB的水溶液,浓度为10mg/ml。EB(溴化乙锭)能与核酸分子特异结合,用于观察琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中DNA或RNA分子。广泛应用于核酸电泳前后的染色以及流式细胞仪的样品染色处理等。溴化乙锭(Ethidium Bromide;C21H20N3Br;分子量为394.32)含有一个可以嵌入DNA 碱基的三环平面基团。它与DNA 的结合没有碱基序列特异性。大约每2.5 个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后,紫外激发后呈现荧光,可以检测到10ng 的DNA 条带。
本品为10mg/ml的溴化乙锭储存液,用于电泳检测时,工作浓度为0.5μg/ml
使用参考
(1)胶染:将 100ml 的琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为 0.8%~2%)放入微波炉中融化,冷却至 60℃左右(不烫手时)后加入 5-10ul EB 核酸染料,轻轻摇匀后倒胶(避免产生气泡),待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫光灯下观察拍照(注:由于在该染料存在的情况下,线状 DNA 的电泳迁移率约降低 15%)。
(2)泡染:琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有 EB(0.5ug/ml)的电泳缓冲液或去离子水中,室温下染色 15-45min(取决于凝胶厚度)。脱色时用去离子水或者 1mM 的 MgSO4 溶液室温浸泡约 10-30min 可降低背景荧光(可选)。

